一、细胞基本属性
- 细胞名称：WM-266-4细胞（人类转移性黑色素瘤细胞系）
- 细胞别称：WM2664；黑色素瘤细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：皮肤转移性黑色素瘤组织（取自女性患者）
- 生长特性：贴壁生长（依赖贴壁基质）
- 细胞形态：不规则纺锤形或多边形，核质比高，可见伪足
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用代数内保证增殖稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（与培养密度及传代操作相关）
- 供应限制：仅限于科研用途，禁止用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种于T25瓶
- 培养瓶：酒精消毒外壁，直接置入CO₂培养箱平衡30分钟
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA，室温消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 显微镜下确认细胞脱离后，立即加入含血清培养基终止消化
- 注意事项
- 避免消化时间过长（易导致细胞损伤）
- 传代后6小时内更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化收集细胞，离心后重悬于冻存液
- 分装至冻存管，程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：细胞迁移实验（P8代细胞应保持高迁移活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录证明）
- 2. 收货后72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- 3. 复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- 4. STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 1. 客户未按推荐培养基培养导致细胞状态异常
- 2. 解冻后存放超过48小时未接种
- 3. 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 4. 未进行支原体检测直接用于共培养实验
（注：以上操作规范及数据基于WM - 266 - 4细胞标准培养条件制定，具体实验需根据实际研究需求调整。）
