一、细胞基本属性
细胞名称:WiDr细胞(人结肠腺癌细胞系)
细胞别称:HT - 29衍生株、结肠癌细胞WiDr
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年女性结肠腺癌患者来源
组织来源:结肠腺癌组织
生长特性:贴壁生长(需预包被基质胶培养瓶)
细胞形态:上皮样,单层铺展呈铺路石样排列
细胞代数:P5 - P10(推荐使用代数,确保基因稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1.2mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间:约48小时(视传代密度与培养基批次)
供应限制:仅用于体外研究,禁止生物医药临床应用
二、细胞培养操作指南
收货处理:
· 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,加入5mL预热培养基重悬
· 培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱4小时,待细胞贴壁后换液
传代标准:融合度达90% - 95%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:6(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
· 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示)
· 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
· 消化终止需加入等体积含血清培养基
· 传代后12小时内避免移动培养瓶以防机械损伤
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含血清冻存液(90%培养基+10% DMSO)
细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
· 离心收集细胞后轻柔混悬于冻存液
· 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
· 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
· 功能验证:CCK - 8法检测P8代细胞增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 到货干冰完全挥发且细胞瓶破裂(需提供开箱视频)
2. 72小时内经qPCR证实支原体污染
3. STR分型与数据库记录不一致(需第三方检测报告)
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基导致细胞形态异常
2. 未按规范进行传代致细胞衰老
3. 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
4. 收货后超72小时未进行复苏操作