一、细胞基本属性
- 细胞名称:人脑胶质瘤细胞(T98G细胞)
- 细胞别称:胶质母细胞瘤细胞;T98 - GBM
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:脑胶质母细胞瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖培养表面涂层)
- 细胞形态:多角形或纺锤形,融合后呈铺路石样单层
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代数以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:MEM培养基(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养条件与传代密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶处理:酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,缓慢混合冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测P10代细胞增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内检测出微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞存活率低于承诺值(需提供染色检测视频)
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形:
- 未按说明书要求进行预涂层培养
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 反复冻融超过3次造成功能损伤
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染