一、细胞基本属性
- 细胞名称:SW837人直肠腺癌细胞
- 细胞别称:SW - 837;SW 837细胞;直肠腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:52岁女性(供体为直肠腺癌转移患者)
- 组织来源:直肠转移灶(原发灶为结肠腺癌)
- 生长特性:贴壁生长(可形成多层聚集)
- 细胞形态:上皮样,多角形或梭形,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用低传代次以维持基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Leibovitz’s L - 15培养基(含10%胎牛血清)
- 培养条件:气相:100%空气(无需CO₂);温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~50 - 60小时(依据传代密度与培养基批次)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置培养箱平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁紧密时需及时传代)。
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟。
- 显微镜下观察细胞间隙增大后,轻拍瓶壁促使脱落。
- 注意事项:
- 避免过度消化导致细胞碎片增多。
- 传代后6小时内避免移动培养瓶,减少机械应力损伤。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存。
- 复苏验证:
- 存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代细胞应保持对数生长趋势)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 收到后72小时内证实支原体污染(需第三方检测报告)。
- STR鉴定结果与存档数据不符(需提供完整电泳图谱)。
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐条件使用L - 15培养基导致细胞脱落。
- 自行修改冻存液配方引发冰晶损伤。
- 未定期进行STR监控造成细胞交叉污染。
- 收到细胞后存放超过7天未复苏。