一、细胞基本属性
细胞名称:SNU - 228细胞
细胞别称:人胃腺癌细胞;胃腺癌上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(性别及年龄信息保密,供体经病理确诊为胃腺癌)
组织来源:胃腺癌组织原代分离
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白涂层)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高,成簇聚集
细胞代数:P5 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与培养基补充物相关)
供应限制:研究用途专用,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于5mL培养基
培养瓶:酒精消毒外壁,静置4小时后首次换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
避免过度消化导致细胞膜损伤
传代后48小时内避免频繁观察
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90% FBS + 10% DMSO
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后梯度降温
程序:4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃ 12h → 液氮转移
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代内增殖速率波动≤15%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证据)
2. 5日内确认支原体污染(需第三方检测报告)
3. STR位点匹配率<90%
不予重发情形:
1. 客户未按规范进行传代导致污染
2. 使用非指定培养基或血清
3. 液氮保存设备故障导致细胞失效
4. 未保留原始冻存管以供复核