一、细胞基本属性
细胞名称:SK - N - AS人神经母细胞瘤细胞系
细胞别称:神经母细胞瘤AS细胞;SK - N - AS亚克隆
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:骨髓转移灶(原发灶为肾上腺神经母细胞瘤)
生长特性:贴壁生长(部分呈现半悬浮聚集态)
细胞形态:不规则多形性,可见短梭形与星形突起
细胞代数:P5 - P15(推荐使用P8 - P12代次)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
培养条件:5% CO₂,37℃恒温,湿度90%
冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,液氮长期保存
增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(受血清浓度影响)
应用限制:仅供肿瘤机制研究,禁止临床移植或转基因动物制备
二、细胞培养操作指南
复苏流程:
冻存管37℃水浴震荡解冻,离心去除冻存液后重悬接种
首次培养基添加20% FBS促进贴壁
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:6(依据实验需求调整)
消化方案:
0.25%胰酶 - EDTA室温消化3 - 5分钟
机械吹打辅助分离,显微镜下确认细胞边缘卷曲
关键事项:
保留部分旧培养基维持代谢适应性
半悬浮细胞需离心后完全重悬再分瓶
定期检测支原体(建议每3代次检测)
三、细胞冻存操作规范
冻存准备:
对数生长期细胞收集,活率需>95%
冻存密度:2×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
程序优化:
梯度降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮储存
推荐使用程序降温仪(每分钟降1℃)
质控指标:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色验证)
冻存后需通过STR鉴定和致瘤性检测
四、售后服务承诺
技术支持:
提供STR鉴定图谱及致瘤性测试报告
赠送专用培养基试用装(5mL)
重发承诺:
到货72小时内活率<80%
细胞交叉污染或STR不匹配
支原体阳性(需提供第三方检测报告)
免责条款:
使用非指定培养基导致的表型改变
连续传代超过P15引发的遗传漂变
未按规范进行定期支原体检测
注:本产品符合ATCC细胞培养标准,每批次附带灭菌证书及质检报告,实验操作需在生物安全二级实验室进行