一、细胞基本属性
细胞名称:SK - MEL - 5人皮肤黑色素瘤细胞
细胞别称:SK - MEL5;黑色素瘤细胞系SK - MEL - 5
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:皮肤恶性黑色素瘤转移淋巴结(原发灶为表皮)
疾病特征:恶性黑色素瘤(源自转移淋巴结的肿瘤细胞)
生长特性:贴壁生长(可形成松散贴壁或半悬浮聚集体)
细胞形态:多形性(包括梭形、星形及不规则多边形,核质比例高)
细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以内以保证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10%FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与血清浓度及传代密度相关)
供应限制:仅限科学研究,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱,24小时内勿移动
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁区域出现重叠生长时需及时传代)
传代比例:1:3至1:6(建议接种密度2×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
部分细胞贴壁不牢,需缩短消化时间
首次传代建议保留原代培养液50%以维持适应性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础冻存液(90%FBS + 10%DMSO)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
对数生长期细胞经胰酶消化后离心收集
梯度降温程序:4℃ 30min→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:黑色素生成能力检测(L - DOPA氧化法)
四、售后服务承诺
重发标准:
到货干冰完全挥发且细胞存活率<80%(需提供开箱视频)
72小时内证实交叉污染(需提供STR鉴定报告)
细胞形态异常且传代无法恢复(附高清相差显微镜照片)
不予重发情形:
使用无血清培养基导致细胞死亡
未按规范进行支原体预防性处理
实验操作污染导致培养体系崩溃
超低温冰箱断电未及时转移细胞