一、细胞基本属性
细胞名称
RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
细胞别称
RAW细胞;小鼠巨噬细胞系;RAW 264.7
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
BALB/c雌性小鼠(经Abelson鼠白血病病毒诱导)
组织来源
单核巨噬细胞系
生长特性
贴壁生长(可形成半悬浮聚集体)
细胞形态
圆形或梭形,单核巨噬细胞典型形态
细胞代数
P5 - P15(推荐使用代数以维持吞噬功能)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含10% DMSO冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间
约16 - 24小时(依据接种密度调整)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
C17小鼠肠上皮干细胞
细胞别称
肠隐窝干细胞;C17细胞系
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
8 - 12周健康成年小鼠(性别随机)
组织来源
小肠隐窝部位
生长特性
贴壁生长(依赖基质胶包被)
细胞形态
柱状上皮形态,核质比高
细胞代数
P3 - P8(维持干性标记物表达)
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
IntestiCult™类器官培养基(含Wnt3a和R - spondin1)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
含10% DMSO的冻存液,液氮长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(依赖生长因子浓度)
供应限制
仅限科研用途,禁止临床或药物筛选
二、细胞培养操作指南
RAW264.7细胞
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面,静置4小时待细胞贴壁后换液
传代标准
融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
避免过度消化导致细胞膜损伤
传代后24小时内避免频繁观察扰动细胞
C17细胞
收货处理
冻存管:37℃水浴解冻后直接接种基质胶包被的培养皿
培养瓶:静置培养箱2小时,待细胞贴壁后首次换液
传代标准
类器官直径达100 - 150μm(通常培养5 - 7天)
传代比例
1:3至1:4(机械吹打分散类器官团块)
消化方法
使用Cell Recovery Solution低温解离基质胶
4℃处理30分钟,离心后重悬于新鲜基质胶
注意事项
避免胰酶消化破坏细胞极性
传代后需补充新鲜生长因子组合
三、细胞冻存操作规范
RAW264.7细胞
冻存液配方
90%完全培养基 + 10% DMSO
细胞密度
1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:脂多糖刺激后TNF - α分泌检测(P10代内有效)
C17细胞
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO + Y - 27632抑制剂)
细胞密度
1×10⁶ cells/mL(以单细胞悬液计算)
冻存步骤
收集类器官并解离为单细胞,离心后重悬于冻存液
直接转移至 - 80℃过夜,次日转入液氮
复苏验证
复苏后类器官形成率≥70%
功能验证:ALPI碱性磷酸酶活性检测(P6代内有效)
四、售后服务承诺