一、细胞基本属性
- 细胞名称:QGP-1人胰腺神经内分泌肿瘤细胞
- 细胞别称:QGP1;胰腺癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:胰腺神经内分泌肿瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(需依赖细胞间接触及基质支持)
- 细胞形态:上皮样细胞,单层贴壁,核质比高,边缘清晰
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及稳定剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(与传代密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不得用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至离心管,加入5mL培养基离心去冻存液
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱4小时,待细胞贴壁后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁至细胞层脱落,立即加入完全培养基终止
- 注意事项:
- 避免消化超时导致细胞膜损伤
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:NSE标志物免疫荧光检测(P8代内需保持阳性表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 客户未按规范进行细胞复苏或传代
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 未定期进行支原体检测引发实验污染
- 液氮保存不当导致细胞失活