一、细胞基本属性
细胞名称:人胰腺癌细胞(Human Pancreatic Carcinoma Cells)
细胞别称:PSN - 1细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:43岁男性(供体确诊胰腺导管腺癌)
组织来源:胰腺导管腺癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖胰蛋白酶消化传代)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高
细胞代数:P3 - P15(推荐使用P5 - P10代次保证增殖活性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:液氮气相长期保存(冻存液含10% DMSO+20% FBS)
倍增时间:约36 - 48小时(密度依赖性显著)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究,禁止临床治疗或生物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,重悬接种
培养瓶:静置4小时后首次换液去除运输代谢物
传代标准:融合度达80% - 90%(高密度易引发自噬)
传代比例:1:4至1:6(建议接种密度3×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
室温消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁观察细胞脱落
注意事项:
终止消化时需添加等体积含血清培养基
每周两次换液避免代谢物积累抑制增殖
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:细胞专用冻存液(含多重细胞保护因子)
细胞密度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL(高密度提升复苏效率)
冻存步骤:
预冷冻存管至4℃后分装细胞悬液
程序降温:4℃ 1h → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝法检测)
功能验证:CCK - 8检测72小时增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录仪显示超温≥10分钟
2. 收到后48小时内证实真菌污染(需提供镜检图像)
3. STR位点匹配率<85%(需第三方检测报告)
不予重发情形:
1. 未使用推荐培养基导致贴壁失败
2. 未按规范进行支原体预防处理
3. 细胞传代超过P15代次后功能异常
4. 实验操作污染导致交叉感染