一、细胞基本属性
- 细胞名称：NTERA - 2clD1细胞
- 细胞别称：NT2/D1细胞、人畸胎瘤细胞克隆D1
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：胚胎性畸胎瘤组织（男性供体来源）
- 生长特性：贴壁生长，可诱导分化为神经元样细胞
- 细胞形态：未分化时呈上皮样，分化后呈现多极神经元形态
- 细胞代数：推荐使用P5 - P15代（保持多能性及分化潜能）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基+10%胎牛血清（FBS）+1%非必需氨基酸
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），液氮长期保存
- 分化潜能：经视黄酸诱导可分化为神经元和胶质细胞
- 供应限制：仅限基础研究使用，禁止临床应用或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶表面消毒后直接置于培养箱平衡2小时。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（未分化状态建议每3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:6（根据实验需求调整，维持高增殖活性需低密度接种）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA，室温消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：分化诱导阶段需更换为含10μM视黄酸的培养基；传代时避免机械刮取，防止自发分化；定期检测Oct - 4表达以确认未分化状态。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：90%基础培养基+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液；程序降温：4℃预冷30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：存活率≥85%（台盼蓝染色法）；分化能力检测：视黄酸诱导7天后通过β - III微管蛋白免疫荧光确认神经元分化效率。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 细胞到货72小时内经流式检测证实存活率＜80%。
- STR鉴定结果与数据库不匹配（需提供完整电泳图谱）。
- 支原体污染经第三方检测机构确认。
- 免责条款：
- 未按规范进行视黄酸诱导导致分化异常。
- 使用非推荐培养基或血清批次。
- 超过建议传代次数（P15）后细胞特性改变。
- 液氮保存中断导致细胞失活。
