一、细胞基本属性
细胞名称
人卵巢癌细胞(NIH:OVCAR-3)
细胞别称
OVCAR-3;卵巢腺癌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
来源背景
源自美国国立卫生研究院(NIH),由卵巢腺癌患者腹水分离建系
组织来源
卵巢腺癌组织
生长特性
贴壁生长(部分细胞可呈半悬浮聚集)
细胞形态
上皮样,不规则多边形,核质比高
细胞代数
P5 - P15(建议使用前10代以确保遗传稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T75培养瓶 或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基
RPMI - 1640(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
胎牛血清冻存液(含10% DMSO), - 150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 60小时(依赖传代密度与培养条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或体外诊断
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
传代比例
1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 部分细胞贴壁不牢,需控制消化时间
• 传代后48小时建议全量换液
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
含90% FBS+10% DMSO
细胞密度
冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
• 消化后离心收集细胞,重悬于冻存液
• 梯度降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
复苏验证
• 复苏后72小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
• 功能验证:CCK - 8法检测增殖活性(P8代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货3天内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形
1. 超低温保存设备故障导致冻存管破裂
2. 使用非推荐培养基或血清
3. 未按规定进行定期传代导致老化
4. 实验操作污染未及时反馈