一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H865[H865]细胞
- 细胞别称：人肺癌细胞系；肺腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年患者来源（具体供体信息保密）
- 组织来源：肺腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需依赖适宜细胞外基质）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁，呈不规则多边形
- 细胞代数：P5 - P10（推荐使用代数以保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10%FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5%CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO），液氮长期保存（-150℃以下）
- 倍增时间：约48 - 60小时（视培养密度及传代操作）
- 供应限制：仅限科研用途，禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，置于37℃培养箱平衡2小时
- 传代标准：融合度达80% - 90%时传代（通常每3 - 5天一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%Trypsin - EDTA，37℃消化2 - 3分钟
- 终止消化后离心，完全培养基重悬
- 注意事项：
- 避免消化过度导致细胞碎片增多
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+10%DMSO+20%FBS
- 细胞密度：推荐冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃30分钟→ - 20℃2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CCK - 8检测增殖曲线（P5代细胞应保持对数生长期活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常（需提供物流温度记录）
- 到货3日内检测出支原体污染（需提供第三方报告）
- 复苏后活率低于85%（需提供染色检测图像）
- 不予重发情形：
- 未按说明书操作导致污染或细胞死亡
- 使用非指定培养基或血清
- 细胞冻存后未经检测直接用于实验
- 超过推荐代数（P10）后出现的功能异常
