一、细胞基本属性
- 细胞名称:人非小细胞肺癌细胞(Non - Small Cell Lung Cancer Cells)
- 细胞别称:NCI - H820;H820
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:来源于肺转移性腺癌患者的胸水样本
- 组织来源:肺腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需依赖适宜细胞外基质)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁,细胞间连接紧密
- 细胞代数:P4 - P10(推荐使用代数以保证功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:约48 - 60小时(依赖细胞密度及培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀。培养瓶表面用75%酒精消毒后,静置于培养箱中2小时待细胞贴壁。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%时进行传代(通常每3 - 4天操作一次)。
- 传代比例:建议1:3至1:4分种(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘收缩后立即加入含血清培养基终止消化。
- 注意事项:避免消化时间过长导致细胞膜损伤,传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础冻存液(含90%培养基+10% DMSO)。
- 细胞密度:冻存浓度建议为1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管。梯度降温程序:4℃平衡30分钟→-80℃过夜→转移至液氮长期保存。
- 复苏验证:复苏后24小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥90%),建议通过CCK - 8法验证增殖活性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监测证明);
- 收到后72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告);
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果);
- STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行预培养基预热或解冻操作;
- 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子;
- 细胞培养箱CO₂浓度或温度长期异常;
- 未在指定代数范围内使用导致的功能异常。
(注:本简介基于标准实验条件编写,具体操作需结合实验室实际环境调整。)