一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H69细胞
- 细胞别称：小细胞肺癌细胞；SCLC细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源于小细胞肺癌患者转移灶组织
- 组织来源：肺转移灶（胸腔积液来源）
- 生长特性：悬浮聚集生长（可形成细胞团簇）
- 细胞形态：圆形或卵圆形，聚集成团，折射率高
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用代数以确保遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与培养密度及传代操作相关）
- 供应限制：仅限于科学研究，禁止用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 悬浮细胞：直接转移至培养瓶，维持密度2×10⁵ cells/mL
- 传代标准：细胞密度达1×10⁶ cells/mL或培养基显著酸化（通常每3 - 4天传代）
- 传代方法
- 离心收集细胞（1000rpm，5分钟）后按1:2至1:4比例稀释于新鲜培养基
- 无需酶消化，直接重悬分装
- 注意事项
- 避免过度离心（建议离心力≤200g）
- 定期检测支原体，培养液中可添加2mM L - 谷氨酰胺
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：NSE（神经元特异性烯醇化酶）免疫荧光检测
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 干冰运输超时导致细胞活性丧失（需提供物流温度记录）
- 到货48小时内证实细菌/真菌污染（需提供显微图像）
- 细胞STR分型与数据库不匹配（需提供完整检测报告）
- 不予重发情形
- 未按悬浮细胞规范操作导致贴壁生长异常
- 自行更换培养基成分影响增殖特性
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
- 超过建议代数（P15）使用导致功能偏移
