一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H526[H526]细胞
- 细胞别称：H526；小细胞肺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：34岁男性（供体为小细胞肺癌患者，伴胸腔积液转移）
- 组织来源：胸腔积液转移灶（原发灶为肺部小细胞癌）
- 生长特性：悬浮生长（部分细胞可轻微贴壁）
- 细胞形态：圆形至椭圆形，悬浮聚集，透光性强
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数内维持肿瘤特性稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10%胎牛血清+1mM丙酮酸钠+2mM L -谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~30 - 48小时（依赖培养密度与血清批次）
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究或药物筛选用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭瓶身，直接静置培养箱平衡
- 传代标准：悬浮细胞密度达1×10^6 cells/mL（建议每周传代2 - 3次）
- 传代比例：1:3至1:5（维持终密度2×10^5 cells/mL）
- 收集方法：离心300×g 5分钟收集细胞，弃上清后轻弹瓶底重悬
- 注意事项：
- 避免剧烈吹打导致细胞机械损伤
- 悬浮培养时定期检测培养基pH值（酚红指示剂变黄需及时换液）
- 贴壁细胞残留需用0.25%胰酶处理30秒后合并收集
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20%胎牛血清+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后缓慢滴加预冷冻存液，程序降温：4℃ 30min→ - 80℃ 24h→转入液氮
- 复苏验证：台盼蓝染色存活率≥90%（需排除细胞碎片干扰），功能验证：NSE（神经元特异性烯醇化酶）免疫荧光染色确认小细胞癌特性
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1.运输温度记录异常导致细胞团块溶解（需提供物流温度曲线）
- 2.72小时内STR检测显示交叉污染（需提供电泳图谱）
- 3.复苏后贴壁率低于40%（悬浮细胞按密度标准评估）
- 4.特定基因表达缺失（需提供qPCR或Western Blot原始数据）
- 不予重发情形：
- 1.擅自改用DMEM等非推荐培养基培养
- 2.未按规范进行离心导致细胞膜破裂
- 3.长期过度传代（超过P15）引发遗传漂变
- 4.未使用无支原体污染验证的血清产品
