一、细胞基本属性
- 细胞名称:人非小细胞肺癌细胞(Non - Small Cell Lung Cancer Cells)
- 细胞别称:NCI - H460;H460
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源于大细胞肺癌患者胸腔积液组织
- 组织来源:肺腺癌转移病灶
- 生长特性:贴壁生长(部分亚系可能呈现松散贴壁特性)
- 细胞形态:上皮样多边形,核质比高,胞体透亮
- 细胞代数:P15 - P25(推荐使用传代稳定性验证区间)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(与培养基血清批次相关)
- 供应限制:研究级细胞模型,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,加5mL培养基重悬;培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:6(依据实验需求调整接种密度)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示剂),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:避免消化不足导致细胞成片脱落;换液频率保持每48小时一次
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:对数生长期收集细胞,冻存液重悬后分装;程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证:复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证:CCK - 8检测增殖曲线应符合标准参数
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录);2. 到货72小时内证实微生物污染;3. 细胞STR位点与ATCC数据库不匹配
- 免责情形:1. 使用非指定培养基培养超过两代;2. 未按推荐密度进行传代导致形态变异;3. 液氮储存设备故障造成的细胞失活;4. 实验污染未及时通报导致的交叉污染