一、细胞基本属性
1. 细胞名称:NCI - H345[H345]细胞
2. 细胞别称:H345;小细胞肺癌细胞;SCLC细胞系
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 组织来源:肺小细胞癌组织
5. 生长特性:贴壁生长(需预包被基质支持)
6. 细胞形态:多形性上皮样,部分呈悬浮聚集
7. 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证遗传稳定性)
8. 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
9. 培养基:RPMI 1640+10%FBS + 1%双抗
10. 培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:饱和湿度
11. 冻存条件:程序降温冻存液(含10%DMSO),液氮长期保存
12. 增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(与培养基补充物相关)
13. 应用限制:仅限于肿瘤机制研究,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
1. 复苏操作
- 冻存管37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
- 首次接种建议使用胶原包被培养器皿。
2. 传代标准:融合度达80% - 90%时传代(约每周2次)
3. 传代比例:1:3至1:4(推荐密度3×10⁴ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液。
- 37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化液。
5. 关键注意
- 定期检测支原体污染(建议每月一次)。
- 悬浮细胞需通过离心收集避免损失。
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存准备
- 选择对数生长期细胞,密度达1×10⁶ cells/mL。
- 冻存液含20%FBS + 10%DMSO。
2. 冻存流程:梯度降温:室温→4℃(30min)→ - 80℃(24h)→液氮转移
3. 质量监控
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝检测)。
- P10代细胞需通过STR比对验证。
- 定期检测NSE分泌水平确认功能特性。
四、售后服务承诺
1. 质保范围
- 干冰运输中泄漏导致细胞失活(需提供包装完整性证明)。
- 到货72小时内证实交叉污染(需提供STR检测报告)。
- 复苏存活率低于承诺标准(需提供规范操作视频)。
2. 免责条款
- 使用非指定培养基导致表型改变。
- 未按规范进行基质包被引发异常贴壁。
- 累计培养超过15代后出现的遗传漂移。
- 实验人员操作失误导致的污染事件。