一、细胞基本属性
细胞名称:人非小细胞肺癌细胞系NCI - H2342
细胞别称:H2342;肺腺癌细胞系;NCI - H2342
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(原代供体信息保密)
组织来源:转移性肺腺癌组织(胸腔积液分离)
生长特性:贴壁生长(需基质包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,可见伪足状突起
细胞代数:P3 - P10(建议使用中低代数以保证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗(青霉素/链霉素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(与培养基批次及传代密度相关)
供应限制:仅限肿瘤机制研究,禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,加5mL培养基重悬
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度3×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 消化终止需立即加入含血清培养基
- 贴壁不稳定,建议使用胶原包被培养皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 1.5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,缓慢混入预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:
- 存活率检测:复苏后贴壁率需≥85%
- 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线(P5代应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 到货干冰耗尽导致细胞失活(需提供开箱视频)
2. 72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)
3. 细胞STR位点与数据库不符(需提供比对图谱)
不予重发情形:
1. 使用无血清培养基导致贴壁失败
2. 未按推荐密度接种引发接触抑制异常
3. 擅自采用三维培养等非常规操作
4. 超过建议代数(P10)仍要求质量保证
(注:本产品需配合专用基质使用,建议首次培养前查阅最新版操作手册)