一、细胞基本属性
细胞名称:人肺腺癌细胞(Human Lung Adenocarcinoma Cells)
细胞别称:H2195;肺腺癌细胞系;NCI - H2195
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(具体信息详见源文献)
组织来源:肺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支持)
细胞形态:上皮样单层,高增殖活性下呈多角形或梭形
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证增殖稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS +1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度及传代操作)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
·冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
·培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
·使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
·37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁至细胞层脱落即终止
注意事项:
·消化后需完全中和胰酶(残留酶影响贴壁)
·传代后12 - 24小时观察贴壁情况,及时补液
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO +90%培养基)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
·离心收集细胞,冻存液重悬后分装至冻存管
·程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
·复苏后48小时内检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
·功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P8代内应保持稳定增殖速率)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 细胞复苏存活率低于80%(经第三方检测确认)
4. STR分型与数据库记录不符
不予重发情形:
1. 未按规范进行传代导致细胞老化
2. 使用非指定培养基或血清类型
3. 冻存管未经梯度降温直接置入液氮
4. 实验操作污染后未及时反馈
(注:本简介基于标准操作流程编写,实际实验需结合文献及预实验结果优化参数。)