一、细胞基本属性
细胞名称:NCI - H2122人非小细胞肺癌细胞
细胞别称:H2122;非小细胞肺癌细胞;NSCLC细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:52岁白人男性(原代取材于胸膜转移灶)
组织来源:肺腺癌转移病灶组织
生长特性:贴壁生长(可形成多层堆积)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,边缘伪足明显
细胞代数:P15 - P25(经STR认证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶 或1.2mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%RH
冻存条件:程序降温专用冻存液(含DMSO及营养基质),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养基血清浓度正相关)
供应限制:研究级细胞模型,禁止用于人体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管复苏:37℃水浴震荡解冻≤2分钟,离心后换液接种
• 培养瓶运输:表面消毒后静置4小时再换液操作
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代2次)
传代比例:1:3至1:5(维持高增殖活性)
消化方法:
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
• 37℃消化3 - 5分钟,观察到间隙增大立即终止
注意事项:
• 避免细胞过度融合(可能诱导自发分化)
• 传代后6小时观察贴壁情况,必要时补加纤连蛋白
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:血清型冻存液(含8% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
• 对数生长期收集细胞,离心后分装冻存管
• 分阶段降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期储存
复苏验证:
• 存活率检测:复苏后2小时台盼蓝染色≥85%
• 功能验证:CCK - 8法测定P20代增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
重发条款:
1. 运输箱温度记录显示异常波动(需提供温度记录仪数据)
2. 到货72小时内经PCR检测证实微生物污染
3. 细胞复苏存活率低于承诺值(需提供染色视频)
4. STR位点匹配率<85%
免责情形:
1. 收到后未执行标准复苏流程
2. 擅自使用无血清培养基培养
3. 未定期进行支原体检测导致交叉污染
4. 超出建议代数继续传代培养