一、细胞基本属性
细胞名称
NCI - H2081人小细胞肺癌细胞
细胞别称
H2081;小细胞肺癌细胞;肺转移癌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
转移性小细胞肺癌患者胸腔积液
生长特性
贴壁生长(依赖基质包被培养器皿)
细胞形态
上皮样单层,多角形至梭形,接触抑制不明显
细胞代数
P5 - P15(建议使用代数以维持遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基
RPMI - 1640培养基(含10%胎牛血清+1%青霉素 - 链霉素双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
胎牛血清冻存液(含10% DMSO),- 150℃以下长期保存
倍增时间
~36 - 48小时(依赖传代密度与培养基批次)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时再观察贴壁
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:6(建议接种密度2×10⁴ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
- 避免过度消化(影响细胞膜完整性)
- 首次传代后48小时内避免换液
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
胎牛血清冻存液(含10% DMSO及葡萄糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 消化后离心去上清,缓慢加入预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P10代细胞应保持对数生长期活性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 7天内证实支原体污染(需第三方检测报告)
3. STR分型与数据库不匹配(需提供完整电泳图谱)
不予重发情形
1. 解冻后超72小时未进行传代操作
2. 使用非指定培养基或血清导致异常
3. 未按规范进行细胞冻存引发冰晶损伤
4. 实验操作污染未及时反馈