一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H2009细胞
- 细胞别称：人肺腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年患者（性别及年龄信息保密，来源于临床病理样本）
- 组织来源：肺腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需依赖特定细胞外基质）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈多角形或铺路石样排列
- 细胞代数：推荐使用P5 - P15代（确保遗传稳定性及功能特性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS及1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：液氮气相长期保存（冻存液含10% DMSO及血清替代物）
- 倍增时间：约36 - 48小时（依培养条件及密度调整）
- 供应限制：仅供科学研究，禁止用于临床、药物开发或生物工程。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管复苏：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种至培养瓶。
- 培养瓶运输：酒精消毒外壁，静置于37℃培养箱2小时后再操作。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:6（依实验需求调整，建议初始接种密度为3×10^4 cells/cm²）。
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止。
- 加入含血清培养基中和消化酶，轻柔吹打形成单细胞悬液。
- 注意事项
- 避免消化过度导致细胞膜损伤，影响贴壁效率。
- 传代后12小时内避免频繁观察，减少环境扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+10% DMSO+20% FBS，现配现用。
- 细胞密度：冻存浓度为1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤
- 消化收集细胞，离心后去上清，缓慢加入冻存液重悬。
- 分装至冻存管，标记细胞信息及冻存日期。
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→转移至液氮长期保存。
- 复苏验证
- 存活率检测：复苏后24小时内台盼蓝染色，活率需≥90%。
- 功能验证：通过CCK - 8检测增殖曲线，确认细胞活性符合标准。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽或温度记录异常（需提供物流凭证及温度曲线）。
- 到货72小时内经检测证实支原体污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏后活率低于85%（需提供台盼蓝染色照片及检测视频）。
- STR鉴定结果与数据库不匹配（需提供完整测序数据）。
- 不予重发情形
- 客户未按手册操作导致污染或细胞死亡（如超时消化、培养基错误）。
- 细胞冻存后未及时转移至液氮或反复冻融。
- 未在到货72小时内反馈问题或提供有效证据。
- 自行改造细胞株或进行基因编辑导致功能异常。
备注：以上操作均需在生物安全二级（BSL - 2）实验室环境下进行。
