一、细胞基本属性
细胞名称
人非小细胞肺癌细胞(Human Non - Small Cell Lung Cancer Cells)
细胞别称
NCI - H1915;肺腺癌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
转移性肺泡细胞癌(原发灶为肺腺癌)
生长特性
贴壁生长(部分细胞可呈现半悬浮状态)
细胞形态
不规则多边形或梭形,核质比高,可见伪足延伸
细胞代数
P5 - P15(建议使用中低代数维持表型稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基
RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
程序降温冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间
~36 - 48小时(与培养基血清浓度相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
培养瓶:酒精消毒外表面,直接置于培养箱复苏4小时。
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)。
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。
注意事项
避免过度消化导致细胞团块形成。
首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
血清型冻存液(含90%培养基+10% DMSO)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
消化后离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀。
直接转入程序降温盒,- 80℃过夜后转移至液氮。
复苏验证
复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)。
功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P8代内增殖速率稳定)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度曲线)
2. 到货7天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供显微照片)
4. STR位点与数据库不匹配
不予重发情形
1. 未按规范进行预培养直接冻存
2. 使用含抗生素培养基超过连续3代
3. 机械刮除法传代导致细胞损伤
4. 未定期进行支原体污染监测