一、细胞基本属性
- 细胞名称:NCI - H1666人非小细胞肺癌细胞
- 细胞别称:H1666;人肺癌细胞H1666
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:肺组织(非小细胞肺癌,大细胞癌亚型)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞间接触抑制)
- 细胞形态:上皮样多角形,单层贴壁排列
- 细胞代数:P3 - P8(建议使用区间以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养密度与传代操作)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱4小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项:
- 避免消化时间过长(影响细胞膜完整性)
- 首次换液需在传代后24小时进行
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P5代细胞应保持对数生长期活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常(需提供物流温度曲线)
- 3日内经检测证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后细胞存活率低于90%
- STR分型结果与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未按说明书要求进行细胞复苏或传代
- 使用非推荐培养基或添加剂导致状态异常
- 细胞冻存管经历多次冻融循环
- 未在收到后72小时内启动复苏流程
备注:本产品需配合标准细胞培养操作规范使用,实验前请查阅相关文献确认适用性。