一、细胞基本属性
细胞名称:人非小细胞肺癌细胞(NCI - H1651)
细胞别称:H1651;人肺腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:肺腺癌组织(取自原发肿瘤病灶)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,贴壁紧密呈片状分布
细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证表型稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10%FBS+1%双抗(青霉素 - 链霉素)
培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(10%DMSO+90%FBS),液氮长期保存
关键特性:保留EGFR基因突变(Exon19缺失),适用于肺癌分子机制研究
供应限制:仅限于基础研究,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
复苏操作:冻存管37℃水浴快速解冻后,离心去除冻存液,重悬于预热培养基;初次接种密度建议1×10⁴ cells/cm²,24小时后首次换液
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(约每5 - 7天)
传代步骤:使用0.25%胰酶 - EDTA消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞间隙增大后终止;离心后按1:3比例传代,推荐基质胶预包被培养皿
注意事项:避免频繁更换培养基(维持自分泌因子平衡);传代后48小时内避免药物处理实验
三、细胞冻存操作规范
冻存准备:选择对数生长期细胞,活率需>95%;冻存密度建议5×10⁶ cells/mL
冻存流程:梯度降温程序:4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃ 12h→液氮储存
质检标准:复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法);每批次提供STR鉴定报告(16位点匹配)
四、售后服务承诺
质控项目:支原体检测(PCR法阴性);细菌/真菌检测(血琼脂培养14天无菌落);细胞活力检测(台盼蓝拒染率≥90%)
售后保障:到货72小时内反馈问题并提供证明材料可申请重发;液氮运输全程温度监控(提供温度记录曲线);免费提供细胞培养技术指导及文献支持