一、细胞基本属性
细胞名称:人非小细胞肺癌细胞(Human Non - Small Cell Lung Cancer Cells)
细胞别称:NCI - H1435;H1435;肺腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:肺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(上皮细胞样特性)
细胞形态:多角形或梭形,核质比高,成片生长
细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以内保证表型稳定)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含完全冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与血清浓度相关)
供应限制:科研专用,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,补加4mL培养基离心去冻存液
- 培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱
传代标准:融合度达80% - 90%(建议隔天观察)
传代比例:1:3至1:6(依据实验需求调整)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化
- 37℃孵育2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后轻拍瓶壁分散
注意事项:
- 首次传代建议保留原代培养基混合使用
- 消化终止后需充分吹打至单细胞悬液
- 避免频繁更换培养基(每周换液2 - 3次)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:完全冻存液(含基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO)
细胞密度:推荐5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,缓慢加入预冷冻存液
- 梯度降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 传代3次后需进行STR鉴定确认细胞身份
- 定期检测支原体(每季度建议PCR检测)
四、售后服务承诺
重发条件:
1. 到货72小时内提供细胞污染证据(细菌/真菌/支原体检测报告)
2. 干冰运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
3. 复苏存活率低于80%(附台盼蓝染色照片)
4. STR位点匹配度<80%
免责情形:
1. 收到细胞后超72小时未进行复苏操作
2. 擅自更改培养基配方导致细胞状态异常
3. 未按要求进行常规支原体检测
4. 液氮保存条件不达标引起细胞失活
(注:本产品需在二级生物安全柜内操作,建议定期进行KRAS基因突变检测以监控细胞特性)