一、细胞基本属性
- 细胞名称:人非小细胞肺癌细胞(Human Non - Small Cell Lung Cancer Cells)
- 细胞别称:NCI - H1373;H1373
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年男性(原代供体确诊为肺腺癌患者)
- 组织来源:肺腺癌组织原代分离
- 生长特性:贴壁生长(部分批次可呈现半悬浮聚集)
- 细胞形态:不规则多边形,核质比高,边缘透亮伪足
- 细胞代数:P4 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(冻存液含胎牛血清)
- 培养基:RPMI - 1640+10%FBS+1%双抗
- 培养条件:恒温37℃、5%CO₂、湿度95%环境
- 冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及营养基质),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与血清批次相关)
- 供应限制:研究级细胞系,禁止临床应用或生物转染实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管建议37℃水浴振荡解冻,离心后重悬接种;培养瓶收货需静置4小时再换液。
- 传代标准:融合度达80% - 90%(快速增殖期建议每日观察)。
- 传代比例:1:3至1:4(维持3×10⁴ cells/cm²接种密度)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA,室温消化2 - 3分钟,离心转速建议1200rpm。
- 注意事项:传代后6小时需补加2mM谷氨酰胺;避免频繁换液扰动贴壁细胞。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:胎牛血清基础冻存液(含8%DMSO及能量代谢底物)。
- 细胞密度:冻存浓度建议5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:梯度降温程序执行:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮长期存储。
- 复苏验证:复苏后48小时进行CCK - 8增殖曲线测定;P5代细胞需完成EGFR基因表达验证。
四、售后服务承诺
- 重发标准:到货干冰耗尽致细胞失活(需提供物流温度记录);7日内证实交叉污染(需STR检测报告);细胞复苏存活率低于85%。
- 免责条款:客户未按推荐密度传代导致的增殖异常;使用非指定生长因子引发的形态变异;液氮存储中断超过72小时造成的不可逆损伤。