一、细胞基本属性
- 细胞名称:人非小细胞肺癌细胞(NCI - H1155)
- 细胞别称:H1155;大细胞肺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:转移性淋巴结(非小细胞肺癌患者来源)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞贴壁基质)
- 细胞形态:上皮样或多角形,部分呈大细胞形态
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10%FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5%CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度及传代条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁紧密时操作)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%Trypsin - EDTA(含低浓度Ca²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性)
- 传代后48小时内避免频繁观察以降低污染风险
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10%DMSO + 90%完全培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管
- 程序降温:4℃30min → - 80℃24h → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:细胞增殖曲线(P8代内应维持对数生长期)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明)
- 到货3天内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(经第三方检测)
- STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐培养基培养导致状态异常
- 冻存管未经梯度降温直接放入液氮
- 传代次数超过推荐范围(P15代以上)
- 未提供污染或STR争议的完整证据链