一、细胞基本属性
NB16细胞为人源肺微血管内皮细胞，别称包括HPMEC、肺微血管内皮细胞及肺动脉内皮细胞，来源于健康成人肺组织微血管段，供体筛选严格排除肺部疾病史，性别不限。该细胞为贴壁生长型，依赖细胞外基质成分，形态呈典型“鹅卵石样”单层排列，接触抑制后表现为多角形。推荐使用代次为P3 - P8，以确保功能稳定性与遗传一致性。细胞规格提供1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液），培养基采用Endothelial Cell Medium（含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂），培养条件为37℃、5% CO₂与95%湿度环境。冻存需使用无血清冻存液（含DMSO及保护剂），长期保存温度需低于-150℃。细胞倍增时间约48 - 72小时，具体受培养密度与基质条件影响。本产品仅限科研用途，禁止用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
细胞收货后，冻存管需37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基混匀；培养瓶需用75%酒精擦拭表面，静置培养箱2小时以平衡环境。传代标准为细胞融合度达85% - 90%，通常每3 - 4天传代一次，推荐传代比例1:2至1:3，接种密度为5×10³ cells/cm²。消化时使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞收缩变圆后立即终止反应。需注意避免过度消化损伤细胞间连接蛋白，传代后24小时需更换培养基以清除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
冻存液采用无血清配方，含10% DMSO及渗透保护剂，细胞冻存密度需为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。冻存步骤包括离心收集细胞、冻存液重悬后梯度降温：4℃静置30分钟，-20℃保存2小时，-80℃过夜后转入液氮长期储存。复苏后需进行验证，24小时内通过台盼蓝染色检测存活率（≥95%为合格），并使用P5代细胞进行Transwell通透性检测以确认基础屏障功能完整。
四、售后服务承诺
符合以下情形可申请重发：运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰状态证明）、3日内证实支原体或细菌污染（附PCR检测报告）、细胞复苏活力低于90%（台盼蓝染色结果）或STR鉴定与声明不符。以下情况不予重发：客户延迟复苏超过72小时、使用非推荐培养基导致细胞异常、反复冻融操作损伤细胞，以及未按规范检测支原体直接实验引发的争议。
