一、细胞基本属性
- 细胞名称：MRC - 5细胞（人胚肺成纤维细胞）
- 细胞别称：人二倍体肺成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：14周男性胚胎（供体筛选无遗传缺陷史）
- 组织来源：胚胎肺组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖血清及生长因子）
- 细胞形态：典型成纤维细胞样，呈长梭形或星形
- 细胞代数：P20 - P30（推荐使用低代次以维持遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Eagle's MEM培养基（含10% FBS + 1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（与培养基成分及传代密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱4小时平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞层脱离后终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞贴壁能力）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃30分钟→ - 80℃过夜→转入液氮
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：细胞增殖曲线检测（P25代内应保持稳定增殖速率）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 收货后72小时内证实支原体污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%
- 细胞STR鉴定与备案信息不符
- 不予重发情形：
- 客户未按规范进行细胞复苏或培养
- 使用非指定培养基导致功能异常
- 未定期检测支原体造成交叉污染
- 细胞代数超过推荐范围引发的状态异常
