一、细胞基本属性
细胞名称:LNCaP clone FGC(LNCaP)细胞
细胞别称:LNCaP - FGC;人前列腺癌细胞克隆株
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性(供体为前列腺癌淋巴结转移患者)
组织来源:人前列腺癌淋巴结转移病灶
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,贴壁后呈多角形或梭形
细胞代数:P15 - P25(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%丙酮酸钠+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(依赖雄激素浓度及培养密度)
供应限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精擦拭表面,静置30分钟后补充2mL培养基
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每周传代1 - 2次)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
• 维持培养基中雄激素浓度(推荐1nM R1881)
• 传代后48小时内避免频繁观察以防影响贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%胎牛血清+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
• 离心收集细胞,缓慢滴加预冷冻存液
• 程序降温:4℃ 30分钟→-80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证:
• 复苏后48小时存活率≥85%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:PSA分泌检测(P20代细胞应保持雄激素敏感性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰耗尽导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 5日内经qPCR证实支原体污染
3. STR位点匹配率<85%
4. 雄激素应答功能缺失(需提供Western blot证明)
不予重发情形:
1. 使用非胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 未按推荐添加雄激素类似物
3. 擅自修改培养基关键成分
4. 超过建议代数(P25)仍要求功能质控
(注:所有操作需遵守生物安全二级实验室规范,细胞特性可能随传代次数发生表型漂移,建议定期进行STR鉴定及功能验证)