一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肺癌细胞(Lewis Lung Carcinoma Cells)
细胞别称:LL/2细胞;LLC细胞;Lewis肺癌细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:C57BL/6小鼠(性别及周龄根据实验需求选择)
组织来源:肺组织(原代肿瘤移植模型来源)
生长特性:贴壁生长(可形成致密单层,具有侵袭特性)
细胞形态:纺锤形或多角形,核质比高,边缘清晰
细胞代数:推荐使用P5 - P15代(保持肿瘤细胞表型稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含完全冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含10% DMSO的完全冻存液, - 150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与培养基成分及传代密度相关)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究或药物筛选,不可用于活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于培养箱静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化1 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
避免消化过度导致细胞集簇
传代后需完全去除旧培养基中的代谢废物
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
消化离心后重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:Transwell侵袭实验(P10代内侵袭能力应保持稳定)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞污染(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于80%
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 使用非标准培养基培养超过48小时
2. 未按规范进行传代导致细胞老化
3. 实验操作污染未及时反馈
4. 液氮保存设备故障导致细胞失活