一、细胞基本属性
1. 细胞名称:人结直肠腺癌细胞(Human Colorectal Adenocarcinoma Cells)
2. 细胞别称:LIM1215;结直肠癌细胞;结肠癌细胞
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 年龄性别:51岁男性(原代供体为结肠癌手术切除样本)
5. 组织来源:结肠腺癌组织
6. 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:上皮样多角形,成片状或岛状密集生长
8. 细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次保证表型稳定性)
9. 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
10. 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
13. 倍增时间:约24 - 36小时(与血清浓度正相关)
14. 供应限制:研究级细胞系,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:冻存管复苏需37℃水浴轻摇解冻,加入5mL培养基离心去除冻存液。培养瓶收货后立即观察贴壁状态,24小时内更换新鲜培养基。
2. 传代标准:融合度达80% - 90%时传代(建议每周传代2次)
3. 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
4. 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA,37℃消化3 - 5分钟至细胞间隙增大,加入等体积血清终止。
5. 注意事项:避免过度传代导致上皮标志物丢失,建议定期检测CEA表达。传代后12小时应完成贴壁。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:含血清冻存液(90% FBS+10% DMSO)
2. 细胞密度:推荐冻存浓度5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤:离心收集细胞后与冻存液轻柔混匀,程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮储存。
4. 复苏验证:存活率≥85%,需检测细胞增殖曲线及EGFR表达水平。
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 到货干冰完全融化导致细胞死亡
- 支原体检测阳性(需提供第三方报告)
- STR分型不符
- 复苏24小时内存活率<80%
2. 不予以重发情形
- 使用无血清培养基培养
- 未按推荐胶原包被培养器皿
- 超过建议代次使用导致的表型改变
- 未执行常规支原体检测
3. 本产品需在生物安全二级实验室操作,实验废弃物需经121℃高压灭菌处理