一、细胞基本属性
- 细胞名称:L5178 - R细胞
- 细胞别称:小鼠淋巴瘤细胞L5178Y - R;L5178Y - R TK+/-
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:来源动物性别及年龄信息详见原始文献
- 组织来源:淋巴瘤组织(经辐射诱变筛选获得的抗性亚系)
- 生长特性:悬浮生长(聚集成团现象明显)
- 细胞形态:圆形或椭圆形,透亮胞质,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10%热灭活马血清+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约18 - 24小时(与培养密度及代谢状态相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶收货后静置培养箱30分钟再轻柔混匀。
- 传代标准:细胞密度达0.8×10^6 - 1.2×10^6 cells/mL时传代(通常每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:4至1:6稀释(维持终密度2×10^5 cells/mL)。
- 注意事项:避免高速离心(推荐200×g离心5分钟);定期检测支原体污染;培养基需补充0.1mM β-巯基乙醇以维持细胞活性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20%胎牛血清+10% DMSO。
- 细胞密度:冻存浓度1×10^7 cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,程序降温盒-80℃过夜后转入液氮。
- 复苏验证:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能性验证需通过TK基因活性检测(Brdu掺入法)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明);
- 72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测影像);
- STR鉴定与数据库不匹配(需提供第三方检测报告)。
- 不予重发情形:
- 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞失活;
- 未按规范进行传代造成细胞密度异常;
- 实验操作污染后未及时反馈(超过7天申诉期)