一、细胞基本属性
细胞名称：KYSE - 270细胞
细胞别称：人食管鳞癌细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：成年食管癌患者（性别及年龄信息保密，供体经病理学确认）
组织来源：食管鳞状细胞癌组织
生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿以增强贴附性）
细胞形态：上皮样，单层铺展后呈不规则多边形，细胞间连接紧密
细胞代数：P3 - P10（建议使用代数以保证增殖活性与基因稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约24 - 36小时（受培养基批次及传代密度影响）
供应限制：仅用于体外研究，禁止临床应用或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时再换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含酚红指示剂）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁至细胞脱落即刻终止
注意事项：
- 消化前用PBS充分清洗以去除血清干扰
- 传代后12小时观察贴壁情况，48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%培养基）
细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CCK - 8检测增殖曲线（P5代细胞应保持对数生长期特性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰耗尽或运输温度异常导致细胞团块溶解（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 细胞复苏存活率低于85%（需提供染色视频及显微镜图像）
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形：
1. 未按说明书预处理培养瓶导致贴壁失败
2. 使用非推荐胶原包被培养器皿
3. 擅自修改培养基配方影响细胞特性
4. 未定期进行支原体检测造成污染扩散
