一、细胞基本属性
细胞名称:KP4 - 1细胞
细胞别称:人胰腺导管腺癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:56岁男性(原发灶为胰腺导管腺癌,肝转移来源)
组织来源:胰腺导管腺癌肝转移组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白基质)
细胞形态:上皮样,呈多角形或纺锤状聚集
细胞代数:P5 - P15(推荐使用中低代数以维持表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素)
培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养基成分及传代密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验。
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;
培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时恢复代谢。
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)。
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)。
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA溶液;
37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落,立即用含血清培养基终止。
注意事项:
避免消化过度导致细胞碎片增多;
传代后48小时内避免频繁观察,减少环境扰动。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)。
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
冻存步骤:
消化后离心,重悬于冻存液;
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存。
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法);
功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代细胞应保持对数生长期活性)。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);
2. 72小时内证实支原体污染(需提供第三方检测报告);
3. 细胞存活率低于80%(需提供台盼蓝染色图);
4. STR分型与数据库记录不符。
不予重发情形:
1. 解冻后超72小时未进行传代培养;
2. 使用非推荐培养基或自行添加生长因子;
3. 因反复冻融导致的细胞损伤;
4. 未按规范进行无菌操作引发污染。