一、细胞基本属性
- 细胞名称：KM12细胞（人结肠癌转移细胞系）
- 细胞别称：KM12结肠癌细胞；KM12转移性结肠癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：结肠癌转移病灶组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质附着）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁，高核质比
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用前10代以维持遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含10% DMSO冻存液，-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（视培养条件而定）
- 应用限制：仅供科研使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（根据实验需求调整接种密度）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA，室温消化1 - 3分钟
- 显微镜下观察细胞间隙扩大后立即终止
- 注意事项：
- 避免过度消化导致细胞损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，重悬于冻存液
- 分装至冻存管，程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：体外侵袭实验验证转移特性
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提交检测报告）
- 细胞STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 未按规范进行细胞复苏或培养
- 使用非指定培养基或添加剂
- 实验操作失误导致污染或死亡
- 超过建议传代次数导致性能异常
