一、细胞基本属性
- 细胞名称:Hs695T细胞
- 细胞别称:人肺腺癌细胞;肺腺癌上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年患者(具体性别及临床病史经匿名化处理)
- 组织来源:肺腺癌组织原代分离
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样多角形,成簇生长,融合后呈铺路石状排列
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次以保证表型稳定性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与血清批次相关)
- 供应限制:研究级产品,禁止用于临床治疗或转基因生物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴轻摇解冻,离心去冻存液后重悬于新鲜培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞密度达80% - 90%(高密度易引发异常分化)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 消化终止需添加含血清培养基(比例≥1:1)
- 传代后48小时内避免频繁观察以防污染
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:标准冻存液(含90%完全培养基+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时计算贴壁率(应≥85%)
- 功能性验证:CCK - 8检测增殖曲线(P10代内应保持稳定)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 到货干冰完全挥发且细胞瓶破裂(需提供开箱视频)
- 7日内经测序证实交叉污染(需提供STR比对报告)
- 原代细胞标志物检测阴性(需提供流式检测数据)
- 不予重发情形:
- 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 自行更改培养基血清浓度引发异常增殖
- 未定期进行支原体清除处理导致污染扩散
- 超过推荐代次使用产生的遗传漂移