一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肺微血管内皮细胞（Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：HPMEC、肺微血管内皮细胞、肺动脉内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）
- 组织来源：肺组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相为5% CO₂ + 95%空气，温度37℃，湿度95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，加入4mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外表面，静置培养箱中平衡2小时。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度为5×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞收缩变圆后立即终止。
- 注意事项：
- 避免过度消化（可能损伤细胞间连接蛋白）。
- 传代后24小时内需更换培养基，以去除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：建议冻存浓度为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后，轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温流程：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内通过台盼蓝染色检测存活率（保证≥95%）。
- 功能验证：Transwell通透性检测（P5代细胞需维持基础屏障功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度失控导致细胞死亡（需提供干冰状态照片）。
- 3日内经检测证实支原体/细菌污染（需提供PCR检测报告）。
- 细胞活力低于90%（台盼蓝染色法）。
- STR鉴定结果与宣传不符。
- 不予重发情形：
- 客户延迟复苏超过72小时。
- 使用非推荐培养基导致细胞状态异常。
- 反复冻融操作引起的细胞损伤。
- 未按规范进行支原体检测即开展实验。
