一、细胞基本属性
本细胞为人肺微血管内皮细胞(Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells),别称包括HPMEC、肺微血管内皮细胞及肺动脉内皮细胞,来源于健康成人肺组织微血管段,供体经严格筛选无肺部疾病史。细胞种属为人类(Homo sapiens),以贴壁方式生长,依赖细胞外基质成分,形态呈典型“鹅卵石样”单层排列,接触抑制后转为多角形。推荐使用P3 - P8代细胞以保证功能稳定性与遗传一致性,细胞规格为1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)。培养基采用Endothelial Cell Medium(含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂),培养条件需维持5% CO₂、37℃恒温及95%湿度环境。冻存采用无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),保存于-150℃以下可长期维持活性,细胞倍增时间约为48 - 72小时,具体受培养密度与基质条件影响。本产品仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验。
二、细胞培养操作指南
收到冻存管后需立即37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀后离心接种;若为培养瓶运输,需用75%酒精擦拭表面并静置于培养箱平衡2小时。传代标准为细胞融合度达85% - 90%,通常每3 - 4天传代一次,推荐按1:2至1:3比例接种,密度控制在5×10³ cells/cm²。消化时使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺),37℃作用1 - 2分钟,镜下观察细胞收缩变圆后立即终止消化,避免损伤细胞间连接蛋白。传代后24小时需更换培养基以清除残留消化酶,维持细胞最佳状态。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方为无血清体系,含10% DMSO及渗透保护剂,冻存密度建议1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。操作流程包括离心收集细胞、重悬于冻存液后梯度降温:4℃预冷30分钟,转至-20℃保持2小时,随后置于-80℃过夜,最终转移至液氮长期储存。复苏后需通过台盼蓝染色验证存活率(≥95%),并对P5代细胞进行Transwell通透性检测,确保基础屏障功能正常。
四、售后服务承诺
若因运输过程温度失控(需提供干冰状态照片)、3天内证实支原体/细菌污染(需提交PCR报告)、细胞活力低于90%(台盼蓝法)或STR鉴定不符,可申请重发。以下情形恕不重发:延迟复苏超过72小时、使用非推荐培养基导致异常、反复冻融操作损伤细胞或未按规范检测支原体即开展实验。