一、细胞基本属性
本产品为人肺微血管内皮细胞(Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells),别称HPMEC、肺微血管内皮细胞或肺动脉内皮细胞,来源于健康成人(性别不限,供体无肺部疾病史)的肺组织微血管段。细胞为贴壁生长型,依赖细胞外基质成分,形态呈典型“鹅卵石样”单层排列,接触抑制后呈现多角形。推荐使用代次为P3 - P8,以确保功能稳定性与遗传一致性。
细胞提供规格为1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液),培养基选用Endothelial Cell Medium(含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂),培养条件为37℃、5% CO₂、95%湿度环境。细胞倍增时间约48 - 72小时,具体与培养密度及基质条件相关。冻存采用无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),需长期保存于 - 150℃以下。本产品仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验。
二、细胞培养操作指南
收到冻存管后需立即37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基混匀离心;培养瓶则需用75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时。传代标准为细胞融合度达85% - 90%,通常每3 - 4天传代一次,推荐按1:2至1:3比例接种(密度5×10³ cells/cm²)。消化时使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺),37℃处理1 - 2分钟,镜下观察细胞收缩变圆后立即终止反应。注意避免过度消化损伤细胞间连接蛋白,传代后24小时需更换培养基以去除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
冻存液为无血清配方,含10% DMSO及渗透保护剂。冻存前需离心收集细胞,重悬密度调整为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL,采用梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。复苏后需验证细胞存活率(台盼蓝染色≥95%)及功能,如P5代细胞需通过Transwell检测维持基础屏障功能。
四、售后服务承诺
若因运输温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片)、3日内证实支原体/细菌污染(附PCR报告)、细胞活力低于90%或STR鉴定不符,可申请重发。以下情形不予重发:延迟复苏超过72小时、使用非推荐培养基导致异常、反复冻融损伤细胞、未规范检测支原体即开展实验。
(以上内容经严格质控,操作请遵循最新版说明书)