一、细胞基本属性
- 细胞名称：人肺微血管内皮细胞（Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells），别称HPMEC、肺微血管内皮细胞或肺动脉内皮细胞。
- 种属来源：来源于健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）的肺组织微血管段，种属为人（Homo sapiens）。
- 生长特性：贴壁生长，依赖细胞外基质成分，形态呈典型“鹅卵石样”单层排列，接触抑制后呈多角形。推荐使用代数范围为P3 - P8，以确保功能稳定性与遗传一致性。
- 细胞规格：提供1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）。
- 培养基与培养条件：采用Endothelial Cell Medium（含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂），培养环境为5% CO₂、37℃恒温、95%湿度。
- 冻存与复苏：冻存液为无血清配方（含DMSO及细胞保护剂），需长期保存于 - 150℃以下。细胞倍增时间约48 - 72小时，具体受培养密度与基质条件影响。
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基混匀后离心接种；培养瓶需用75%酒精擦拭表面，静置于培养箱平衡2小时后使用。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%时传代（通常每3 - 4天一次），推荐传代比例1:2至1:3，接种密度为5×10³ cells/cm²。
- 消化方法：使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）于37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞收缩变圆后立即终止消化。注意避免过度消化损伤细胞间连接蛋白，传代后24小时需更换培养基以去除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液与密度：采用无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂），冻存浓度为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，按梯度降温程序操作：4℃静置30分钟 → - 20℃放置2小时 → - 80℃过夜 → 转入液氮长期保存。
- 复苏验证：复苏后需通过台盼蓝染色检测存活率（≥95%为合格），并通过Transwell通透性检测验证P5代细胞的基础屏障功能。
四、售后服务承诺
- 重发标准：以下情形可申请重发：运输过程中温度失控导致细胞死亡（需提供干冰状态照片）；3天内证实支原体或细菌污染（需提交PCR检测报告）；细胞复苏活力低于90%（台盼蓝染色法）；STR鉴定与宣传不符。
- 不予重发情形：包括延迟复苏超过72小时、使用非推荐培养基导致状态异常、反复冻融操作引起损伤、未按规范进行支原体检测即开展实验等。
