一、细胞基本属性
- 细胞名称:HL - 60 Clone 15细胞
- 细胞别称:HL - 60C15;人早幼粒细胞白血病细胞克隆亚系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自急性早幼粒细胞白血病患者外周血
- 组织来源:外周血白细胞(经体外诱导分化筛选)
- 生长特性:悬浮生长(可形成疏松细胞团簇)
- 细胞形态:圆形或类圆形,单细胞悬浮为主
- 细胞代数:P10 - P20(推荐使用代数,保证分化稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%青霉素 - 链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(依赖细胞密度与传代处理)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:直接转移至培养箱静置,避免剧烈震荡
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐起始密度2×10^5 cells/mL)
- 分瓶方法:
- 无需消化,直接离心收集细胞后按比例稀释
- 轻柔吹打分散细胞团,避免机械损伤
- 注意事项:
- 维持细胞密度低于2×10^6 cells/mL(防止自发分化)
- 更换培养基时保留部分旧培养基以维持代谢平衡
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:PMA诱导分化实验(CD11b表达率应>70%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7天内证实支原体污染(需提供荧光染色或PCR结果)
- 细胞存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 解冻后未及时离心去除冻存液(导致DMSO毒性)
- 使用含高浓度分化诱导剂未提前沟通
- 长时间过度培养导致自发分化(密度>3×10^6 cells/mL)
- 未按规范进行细胞计数及活力检测