一、细胞基本属性
细胞名称：人肝癌细胞Hep3B
细胞别称：Hep - 3B；Hep 3B；Hep3B
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：7岁男性（原发肝细胞癌组织来源）
组织来源：肝癌组织（伴乙型肝炎病毒感染背景）
生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态：上皮样，单层贴壁，核质比高
细胞代数：P5 - P15（建议使用中低代次保证表型稳定）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO），-150℃以下长期保存
倍增时间：~36 - 48小时（受细胞密度及传代操作影响）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，直接转移至含5mL培养基的T25瓶
培养瓶：静置30分钟后补加2mL培养基，24小时后首次换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
终止消化时需加入等体积含血清培养基
传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：含血清冻存液（90%培养基+10% DMSO）
细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤：
消化后离心去上清，轻柔重悬于预冷冻存液
梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证：
复苏后48小时检测贴壁率（应≥85%）
功能验证：AFP分泌检测（P8代细胞应维持分泌特性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供温度记录曲线）
2. 72小时内证实真菌/细菌污染（需提供革兰氏染色报告）
3. 复苏后贴壁率低于80%（需提供相差显微镜图像）
4. STR分型与数据库不匹配（需提供完整电泳图谱）
不予重发情形：
1. 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁不良
2. 自行更换培养基配方影响细胞增殖
3. 未按规范进行胶原酶辅助消化
4. 超代次使用（P15以上）导致的表型改变
