一、细胞基本属性
细胞名称HEPG2/221细胞
细胞别称Hep G2/221；人肝癌细胞系
种属来源人（Homo sapiens）
年龄性别成年男性（原代取自肝癌患者肝组织）
组织来源肝癌组织
生长特性贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态上皮样，单层贴壁呈不规则多边形
细胞代数P5 - P10（建议使用前完成功能验证）
细胞规格1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%双抗）
培养条件气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件无血清冻存液（含8% DMSO及保护剂），液氮长期保存
倍增时间约24 - 48小时（依赖培养密度及血清批次）
供应限制仅限科研用途，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时再换液
传代标准细胞融合度达80% - 90%（建议每周传代2次）
传代比例1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）；37℃消化3 - 5分钟，轻柔拍打至细胞脱落
注意事项避免多次离心（易导致细胞聚团）；传代后48小时内避免频繁观察（贴壁敏感期）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方专用无血清冻存液（含8% DMSO + 20% FBS）
细胞密度冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤消化后离心收集，缓慢加入预冷冻存液；程序降温：4℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）；功能验证：AFP分泌量检测（P8代细胞应维持肝癌特性）
四、售后服务承诺
重发标准1.物流温度记录异常（需提供运输温度曲线）；2.48小时内证实真菌/支原体污染（需提供电镜扫描图）；3.细胞贴壁率低于70%（需提供接种后24小时影像）
不予重发情形1.未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败；2.擅自改用悬浮培养体系；3.超过建议代数（P10）仍要求性能保证；4.未按规范进行肝癌标志物验证
