一、细胞基本属性
细胞名称:人乳腺癌细胞HCC1954
细胞别称:HCC1954细胞系、乳腺导管癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:女性乳腺癌患者(原代取材信息保密)
组织来源:乳腺导管癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞间接触)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高,贴壁紧密
细胞代数:P3 - P10(建议使用稳定代数以保证表型一致性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及血清),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与血清浓度相关)
供应限制:仅限于基础研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于5mL培养基
- 培养瓶:酒精消毒后直接放入培养箱平衡4小时
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度3×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 室温消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项:
- 避免过度传代(可能导致表型漂移)
- 定期检测支原体污染(建议每月检测)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含90% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 细胞悬液与冻存液等体积混合
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线应符合标准参数
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实细菌/真菌污染
3. STR位点匹配率<80%
4. 细胞复苏存活率<80%
不予重发情形:
1. 未按说明书进行传代操作
2. 使用非指定培养基培养超过3代
3. 未定期进行支原体检测导致污染扩散
4. 液氮保存设备故障导致细胞失活