一、细胞基本属性
细胞名称
人乳腺癌细胞(HCC1428)
细胞别称
HCC - 1428;乳腺导管癌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
成年女性(供体信息保密,经病理学确诊为乳腺导管癌)
组织来源
乳腺导管癌组织原代分离
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
上皮样多边形,核质比高,成簇聚集生长
细胞代数
P5 - P15(推荐使用代数以保证表型稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基
RPMI - 1640培养基(含10%FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
程序降温冻存液(含DMSO及血清成分),液氮气相长期保存
倍增时间
约36 - 48小时(与血清批次相关)
供应限制
仅限肿瘤机制研究,禁止体内移植或基因治疗用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴轻摇解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精消毒外壁,静置4小时后换液培养
传代标准
细胞覆盖率达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例
1:3至1:6(根据实验需求调整接种密度)
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 首次传代前需完成细胞复苏适应性培养
• 传代后6小时内避免移动培养器皿
• 定期检测EGFR/HER2表达维持情况
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
含90%胎牛血清+10%DMSO
细胞密度
冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
• 消化后离心去除胰酶,缓慢滴加冻存液混匀
• 分装至冻存管后立即置于程序降温盒
• 梯度降温:4℃1h→ - 80℃24h→液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后48小时检测贴壁率(应>85%)
• 功能性验证:CCK - 8法检测增殖曲线(需符合标准斜率)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录异常(需提供温度追踪报告)
2. 到货72小时内检测出支原体污染(需提供电镜照片)
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供培养过程影像记录)
4. STR分型与数据库不匹配(需提供第三方检测报告)
不予重发情形
1. 使用非标准培养基培养超过三代
2. 未按规范进行胰酶浓度梯度测试
3. 私自进行基因编辑操作导致污染
4. 未在液氮储存条件下超期保存