一、细胞基本属性
- 细胞名称：HARA - B细胞（Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells）。
- 细胞别称：HPMEC、肺微血管内皮细胞、肺动脉内皮细胞。
- 种属来源：人（Homo sapiens）。
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）。
- 组织来源：肺组织微血管段。
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）。
- 细胞形态：典型“鹅卵石样”单层，接触抑制后呈多角形。
- 细胞代数：推荐使用P3 - P8代（保证功能稳定性与遗传一致性）。
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）。
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS及内皮细胞生长因子添加剂）。
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%。
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），需于 - 150℃以下长期保存。
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）。
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后，静置培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：推荐1:2至1:3（接种密度建议为5×10³ cells/cm²）。
- 消化方法
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞收缩变圆后立即终止消化。
- 注意事项
- 避免过度消化（可能损伤细胞间连接蛋白）。
- 传代后24小时内需更换培养基，以去除残留消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度需达1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后，轻柔重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→转入液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（合格标准≥95%）。
- 功能验证：Transwell通透性检测（P5代细胞应维持基础屏障功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度失控导致细胞死亡（需提供干冰状态照片）。
- 收货后3天内证实支原体/细菌污染（需提供PCR检测报告）。
- 细胞复苏活力低于90%（台盼蓝染色法）。
- STR鉴定结果与宣传信息不符。
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过72小时。
- 使用非推荐培养基导致细胞状态异常。
- 反复冻融操作引起细胞损伤。
- 未按规范进行支原体检测即开展实验。
注：所有操作需遵守生物安全规范，实验前请详阅产品说明书。
