H69AR细胞

人细胞系

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XM-X12931×10^6 人细胞系8800


一、细胞基本属性

细胞名称:人小细胞肺癌细胞(H69AR)

细胞别称:H69AR细胞;H69多药耐药亚系

种属来源:人(Homo sapiens)

年龄性别:成年患者(具体性别信息未公开)

组织来源:小细胞肺癌组织(经化疗药物筛选获得耐药株)

生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)

细胞形态:不规则梭形或椭圆形,贴壁后呈散在分布

细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次维持耐药特性)

细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)

培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%青霉素/链霉素+0.1mM β-巯基乙醇)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存

耐药特性:对阿霉素等蒽环类药物具有显著耐药性(需定期验证)

供应限制:仅供肿瘤耐药机制研究,不可用于临床或体内实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基

• 培养瓶:酒精消毒表面后立即转入CO₂培养箱

传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代2次)

传代比例:1:3至1:4(维持高增殖活性需避免过度稀释)

消化方法:

• 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液

• 37℃消化3 - 5分钟,机械轻拍促进脱落

注意事项:

• 培养器皿需预包被0.1mg/mL胶原蛋白

• 定期检测多药耐药基因(MDR1)表达水平


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:90% FBS+10% DMSO

细胞密度:冻存浓度≥5×10⁶ cells/mL

冻存步骤:

• 消化后细胞悬液离心去上清

• 梯度降温程序:4℃ 30min→ - 80℃过夜→液氮长期存储

复苏验证:

• 复苏存活率≥85%(需在6小时内贴壁)

• 耐药性验证:每3个月进行IC50值测定(阿霉素浓度梯度实验)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供温度记录曲线)

2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染

3. STR分型与数据库记录不符(需提供第三方检测报告)

不予重发情形:

1. 未使用推荐胶原包被导致细胞贴壁失败

2. 擅自更改培养基成分影响耐药表型

3. 未定期传代导致细胞自发分化

4. 超过建议代次(P15)后出现的遗传漂移